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液相色譜系統(tǒng)常見故障排查與修復(fù)指南

更新時間:2025-06-19      點擊次數(shù):150

液相色譜(LC)系統(tǒng)故障排查指南

一、基線問題 (Baseline Issues)

1.1 基線漂移 (Baseline Drift)

現(xiàn)象:基線隨時間持續(xù)向上或向下移動,而非保持水平

排查步驟:

  • 流動相檢查:

    • 溶劑純度/質(zhì)量:是否使用HPLC級溶劑?水相是否滋生微生物?

    • 混合均勻性:梯度程序設(shè)置是否正確?是否充分脫氣?

    • 溫度穩(wěn)定性:柱溫箱溫度是否穩(wěn)定?環(huán)境溫度波動是否超過±2℃?

  • 檢測器檢查:

    • 光源穩(wěn)定性:氘燈/鎢燈使用時長是否超過2000小時?

    • 流通池:池內(nèi)是否有氣泡?池窗清潔度如何?

  • 色譜柱檢查:是否完成平衡(建議10-30倍柱體積沖洗)?

  • 系統(tǒng)泄漏:檢查所有高壓連接處(建議使用檢漏液)

修復(fù)方法:

  1. 立即更換新鮮HPLC級溶劑,使用0.22μm濾膜過濾

  2. 重新配制緩沖鹽溶液,使用pH計精確校準(zhǔn)

  3. 執(zhí)行流通池清洗程序(推薦使用10%稀硝酸30分鐘)

  4. 檢查所有管路接頭,重點檢查泵后至進(jìn)樣器段

1.2 基線噪聲過大 (Excessive Baseline Noise)

現(xiàn)象:基線呈現(xiàn)高頻毛刺狀抖動,噪聲值超過0.5mAU

重點排查項:

  • 氣泡問題:流動相是否脫氣?溶劑瓶濾頭是否堵塞?

  • 檢測器光源:是否出現(xiàn)能量輸出波動(建議使用內(nèi)置診斷程序檢測)

  • 泵系統(tǒng):單向閥清洗頻率是否低于推薦值(建議每500小時清洗)

修復(fù)建議:

  1. 執(zhí)行三步排氣法:溶劑瓶排氣 → 泵頭排氣 → 流通池排氣

  2. 更換檢測器光源(氘燈建議每2000小時更換)

  3. 使用異丙醇超聲清洗單向閥(40kHz,20分鐘)

二、壓力異常 (Pressure Abnormalities)

2.1 壓力過高 (High Pressure)

現(xiàn)象:系統(tǒng)壓力超過正常值20%以上或達(dá)到儀器壓力上限

排查優(yōu)先級:

  1. 保護(hù)柱/在線過濾器(80%故障源于此)

  2. 色譜柱入口篩板(建議使用20倍放大鏡觀察)

  3. 進(jìn)樣系統(tǒng)(檢查定量環(huán)體積是否匹配)

  4. 泵出口過濾器(建議每3個月檢查)

處理流程:

  1. 執(zhí)行分段壓力測試(斷開色譜柱觀察壓力)

  2. 反向沖洗色譜柱(流速≤1ml/min,持續(xù)30分鐘)

  3. 使用DMF超聲清洗進(jìn)樣針(60℃,30分鐘)

2.2 壓力過低 (Low Pressure)

現(xiàn)象:系統(tǒng)壓力低于正常值30%或無法建立壓力

緊急處理步驟:

  1. 立即執(zhí)行系統(tǒng)保壓測試(關(guān)閉所有出口觀察壓力變化)

  2. 檢查溶劑瓶液位(建議設(shè)置低液位報警)

  3. 執(zhí)行Purge/Prime程序(建議使用100%甲醇沖洗)

三、峰形問題 (Peak Shape Problems)

3.1 峰拖尾 (Peak Tailing)

現(xiàn)象:峰不對稱度(As) > 1.2,后沿呈現(xiàn)明顯平臺

優(yōu)化建議:

  • 流動相優(yōu)化:添加0.1%三乙胺(堿性化合物)或0.05%醋酸(酸性化合物)

  • 色譜柱維護(hù):執(zhí)行柱再生程序(甲醇:乙腈=1:1,24小時沖洗)

  • 系統(tǒng)升級:將管路內(nèi)徑從0.010"改為0.005"(可減少30%柱外效應(yīng))

四、安全注意事項

  • 高壓操作:系統(tǒng)壓力可達(dá)6000psi,操作時必須佩戴防護(hù)眼鏡和手套

  • 化學(xué)品處理:使用有機(jī)溶劑時應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)操作

  • 斷電維護(hù):進(jìn)行管路連接/拆卸前務(wù)必關(guān)閉電源并釋放系統(tǒng)壓力

注:本指南建議配合廠商維護(hù)手冊使用,定期更換消耗品(泵密封圈建議每500小時更換,進(jìn)樣針密封墊每1000次進(jìn)樣更換)。建議建立設(shè)備維護(hù)日志,記錄壓力、流速等關(guān)鍵參數(shù)變化趨勢。


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